Análise de hipermutação somática do IGH, Para LLC, Vários Materiais

Orientações do cliente

I - Informações sobre o exame

• O exame consiste na análise de mutação no gene IGHV.
• Este teste está indicado para avaliação prognóstica de indivíduos com diagnóstico de leucemia linfoide crônica, especificamente para a avaliação da presença de mutações no gene IGHV .

II - Material

• O teste pode ser feito em amostras de sangue periférico ou de medula óssea, conforme critério médico, colhidas ou não no Laboratório.

III - Medula óssea

• Caso seja solicitada a coleta de medula óssea no Laboratório, o cliente deve agendá-la previamente.

IV - Material enviado

• A amostra tem de ser mantida sob refrigeração e entregue até 24 horas após a coleta.
• Materiais enviados com agulha de punção não são aceitos.

Orientações necessárias

I - Informações sobre o exame

• O exame consiste na análise de mutação no gene IGHV.
• Este teste está indicado para avaliação prognóstica de indivíduos com diagnóstico de leucemia linfoide crônica, especificamente para a avaliação da presença de mutações no gene IGHV.

II - Material

• O teste pode ser feito em amostras de sangue periférico ou de medula óssea, conforme critério médico, colhidas ou não no Fleury.

III - Medula óssea

• Caso seja solicitada a coleta de medula óssea no Fleury, o cliente deve agendá-la previamente.

IV - Material enviado

• A amostra tem de ser mantida sob refrigeração e entregue até 24 horas após a coleta.
• Materiais enviados com agulha de punção não são aceitos.

Processamento e adequação da amostra

• Receber a amostra em embalagem REF e mantê-la nesta condição até a manipulação.
• Não manusear.
• Enviar o material em refrigerado o mais rápido possível com a sinalização de envio urgente.
• Rejeitar amostras colhidas em heparina.
• Não será aceito material enviado em seringa com agulha.

Estabilidade da amostra:

• Temperatura ambiente: não aceitável
• Refrigerada (2-8 ºC): 24 horas
• Congelada (-20 ºC): não aceitável.

Método

Transcrição reversa do RNA e amplificação dos rearranjos referentes ao gene IGHV por meio de PCR, utilizando-se primers Leader e/ou FR1. Sequenciamento bidirecional por eletroforese capilar do gene IGHV. Análise de bioinformática aplicada por meio da ferramenta IMGT V-Quest.

Valor de referência

A interpretação do resultado do exame será reportada no laudo.

Interpretação e comentários

A presença ou ausência de hipermutação somática na região variável do gene de cadeia pesada de imunoglobulina (IGHV) é um dos principais fatores prognósticos na avaliação de pacientes com leucemia linfocítica crônica. A ausência de hipermutação somática em pacientes com LLC (casos não mutados) confere menor sobrevida global e menor sobrevida livre de eventos quando comparada a casos de LLC contendo hipermutação somática desse gene (mutados). O estado de IGHV mutado é conferido quando a frequência de mutação é inferior ou igual a 2% (ou = 98% de identidade da sequência germinativa) e está associado a um prognóstico relativamente adverso (Oscier D et al, Blood 2002; 100: 1177-84).