Manual de exames

Hibridação in situ, por fluorescência, para LLC, Vários Materiais

Outros nomes: FISH para o rearranjo IgH/BCL2, FISH para os cromossomos 14 e 18, FISH para Leucemia Linfocítica Crônica (LLC), FISH para Leucemia Linfoide Crônica (LLC), FISH (hibridação in situ por fluorescência) para LLC (leucemia linfótica crônica, FISH (hibridação in situ por fluorescência) para Leucemia Linfótica Crônica LLC, FISH para regiões dos cromossomos 11, 12, 13 e 17 para LLC (leucemia linfótica c, FISH para os cromossomos 11, 12, 13 e 17 para LLC

Este exame não precisa ser agendado

Orientações necessárias

I- Critérios de realização
O exame é realizado em material de medula óssea ou em sangue periférico.

II - Para coletas no Fleury
- A coleta de amostra em medula óssea precisa ser marcada com antecedência.

Processamento e adequação da amostra

- Encaminhar o material o mais rápido possível (período de 24 horas), sob refrigeração, ao setor, juntamente com o questionário previamente preenchido pelo cliente e receita médica impressa ou digitalizada.

Atenção: Somente serão aceitas amostras colhidas em heparina sódica ou em EDTA.

Método

- Hibridação "in situ" por fluorescência.
- Trata-se de reação onde se usa sonda molecular (sequência de DNA) marcada com fluorocromo, a qual se liga ao DNA alvo complementar.
- São analisadas 200 intérfases por 2 ou mais observadores.

Valor de referência

1- deleção ATM quando > 5.6% das células apresentarem apenas um sinal correspondentes à região 11q22.3;
2- trissomia 12 quando > 5.0% das células com três sinais correspondentes ao centrômero do 12;
3- deleção RB1 quando > 5.6% das células apresentarem apenas um sinal correspondente à região D13S31-D13S25;
4- monossomia 17 quando > 6.2% das células apresentarem apenas um sinal correspondente à região D17Z1 e 17p13.1 (Glasman et al., 2005);
5- deleção MYB quando > 4.51% das células apresentarem um sinal correspondente à região 6q23.3.
6- IGH quando > 4.4% de células com sinais anômalos.
7- deleção TP53: quando > 6,2% das células apresentarem sinais anômalos.
8- Rearranjo IGH/CCND1: quando > 6,8% das células apresentarem sinais anômalos.
9- Rearranjo IGH/BCL2: quando > 6,2% das células apresentarem sinais anômalos.

Interpretação e comentários

O painel para Leucemia Linfocítica Crônica (LLC) foi elaborada para permitir a detecção das anormalidades genéticas mais frequentes nessa neoplasia, ou seja, a trissomia do cromossomo 12, deleção do gene MYB no cromossomo 6, deleção do gene ATM no cromossomo 11, deleção do gene RB1 e a deleção do gene TP53 no braço curto do cromossomo 17. Além disso, permite a pesquisa dos rearranjos IGH/CCND1, IGH/BCL2 e IGH BAR. Este exame é indicado no diagnóstico, no prognóstico e no monitoramento da doença.

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